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恒美智造梯度PCR仪（基因扩增仪）HM-T96校准流程

文章来源：山东恒美电子科技有限公司    发布时间： 2026-04-27 14:54:44    浏览次数：169次

恒美智造HM-T96梯度PCR仪的温度校准流程、校准标准和维护建议，供用户和技术人员参考执行。

一、校准的必要性

PCR反应对温度高度敏感。变性温度偏差0.5℃可能导致模板不完全变性；退火温度偏差1℃可能导致引物非特异性结合或结合效率下降。因此，PCR仪的温度准确性和均匀性需要定期校准验证，确保设备始终在标称精度范围内运行。

• HM-T96标称温度准确性：±0.20℃

• HM-T96标称温度均匀性：±0.25℃

• HM-T96标称梯度准确性：±0.3℃

• 建议校准周期：每12个月或当怀疑温度偏差时

二、校准前准备

2.1 校准设备

• 标准温度测量设备：经计量检定合格的多通道温度记录仪（精度≤±0.1℃）

• 温度传感器：T型或K型热电偶探头，至少8通道

• PCR管模拟器或标准96孔校准模块

• 导热硅脂或矿物油（用于模拟管内液体的热接触）

• 记录工具：校准记录表、计算器

2.2 环境条件

• 环境温度：20±5℃

• 相对湿度：≤80%

• 无强气流干扰

• 设备需预热运行至少30分钟

三、温度准确性校准流程

3.1 测试点选择

按照PCR反应三个关键温度段选取校准测试点：

测试点

设定温度

对应PCR步骤

允许偏差

低温点

50.0℃

退火温度段

±0.3℃

中温点

72.0℃

延伸温度段

±0.3℃

高温点

95.0℃

变性温度段

±0.3℃

 

3.2 操作步骤

• 步骤1：将温度传感器探头放置于模块指定孔位（建议覆盖中心、四角和边缘共8个位置）

• 步骤2：在HM-T96上编程设定**个测试温度（50.0℃），保持时间设定为10分钟

• 步骤3：启动运行，等待温度稳定后（通常3-5分钟），记录标准温度计8个通道的读数

• 步骤4：计算8个位置的平均温度，与设定温度的偏差即为温度准确性

• 步骤5：8个位置的*大温差即为温度均匀性

• 步骤6：重复步骤2-5，完成72.0℃和95.0℃测试点的校准

四、梯度温度校准流程

4.1 梯度校准设定

设定梯度范围：50.0℃-65.0℃（覆盖常用退火温度段），保持时间10分钟。将传感器探头分别放置于梯度方向上的8-12个孔位。

4.2 操作步骤

• 步骤1：编程设定梯度温度范围50.0~65.0℃

• 步骤2：启动梯度计算器，记录仪器显示的各列理论温度值

• 步骤3：运行程序，温度稳定后记录各探头实际温度

• 步骤4：比较实际温度与理论温度的偏差，评估梯度准确性（允许偏差±0.4℃）

• 步骤5：记录同列不同行位置的温度差，评估梯度均匀性（允许偏差±0.4℃）

五、校准结果判定

校准项目

合格标准

处理方式

温度准确性

偏差≤±0.3℃

合格，记录存档

温度均匀性

*大温差≤±0.4℃

合格，记录存档

梯度准确性

偏差≤±0.4℃

合格，记录存档

任一项不合格

超出允许偏差

联系恒美智造售后进行调校

 

六、校准记录管理

• 每次校准须填写校准记录表，内容包括：校准日期、环境条件、标准器信息、各测试点数据、校准结论

• 校准记录须由校准人员和审核人员双签确认

• 校准记录保存期限不少于设备使用期限

• 建议建立电子化校准档案，便于追溯和趋势分析

七、日常温度验证建议

在正式校准周期之间，建议每季度进行一次简易温度验证：

• 使用95℃/72℃/55℃三点快速验证模块温度准确性

• 记录验证结果并与上次校准数据对比

• 如发现偏差有增大趋势，提前安排正式校准

八、恒美智造校准支持服务

• 技术指导：恒美智造售后团队可远程指导用户自行完成校准操作

• 上门校准：可安排专业技术人员上门提供校准服务

• 计量检定协助：协助用户联系计量检定机构，提前3个月发送检定提醒

• 校准培训：培训内容覆盖校准原理、操作流程和数据分析



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